配制實驗室潔凈區內毒素污染如何控制

細胞培養中

微生物案例

微生物檢測實驗室反饋：

使用熱滅菌方式無法殺滅耐熱菌，芽孢有殘留。

導致培養基內毒素超標，將影響細胞培養效果和

微生物的培養效果。

細胞培養中，培養體系中可能會

受到內毒素的干擾。生物實驗室中，

內毒素主要來自于各類配試劑所用的水、

各類培養基、血清及其他添加劑、實驗器皿表面等。

內毒素更像是一個“隱形的殺手"，

日常實驗中不顯山不露水，

關鍵時刻很可能對實驗結果造成“致命一擊"，

導致結果出現偏差，影響實驗穩定性。

收藏幾類情況更應關注內毒素的影響：

1、養干細胞時，干細胞對內毒素非常敏感，如果血清中內毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易死亡。

2、養免疫細胞時，過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

3、基因敲除相關的細胞實驗，培養的細胞要盡可能保持其原始狀態，任何引導細胞衰老或凋亡的試劑，都會讓后續的實驗結果“失之毫厘，謬以千里"。在準備血清和其他試劑時，選擇極低的內毒素（最好≤1EU/ml），對實驗至關重要。

4、原代培養、雜交瘤融合、細胞轉染，或者肝細胞、神經細胞、內皮等難養細胞的擴增，這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此，挑選更低的內毒素，是保證實驗順利的第一步。

5、實驗室有些細胞，需要長期培養、長期凍存，或者經常復蘇、經常培養的，血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康，都應該選用更低內毒素的血清，以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。

總之，控制培養基內毒素水平是保證實驗結果準確和可靠的重要環節。通過選擇合適的培養基成分、嚴格的無菌操作和合理的培養條件，以及定期檢測培養基內毒素水平，可以最大限度地減少內毒素的產生，保證實驗的可靠性。